Після пункції фолікулів та запліднення яйцеклітин починається один із найбільш хвилюючих для пацієнтів етапів програми ЕКЗ — розвиток ембріонів в ембріологічній лабораторії.
Саме в цей період цифри можуть поступово змінюватися: наприклад, отримали 10 яйцеклітин, зрілими виявилися 8, нормально запліднилися 7, а до стадії бластоцисти розвинулися 3 ембріони.
Таке зменшення кількості не означає автоматично, що з програмою або роботою лабораторії щось не так. На кожному етапі розвитку частина яйцеклітин та ембріонів може припиняти подальший розвиток через їхні біологічні особливості.
- Що відбувається після запліднення
- 1 день: що означає 2PN
- 2 день: початок поділу ембріона
- 3 день: стадія дроблення
- 4 день: морула
- 5–6 день: формування бластоцисти
- Чому кількість ембріонів зменшується
- Чому ембріон може зупинитися в розвитку
- Чи гірша бластоциста 6-го дня
- Що означають 4AA, 3BB, 5AB
- Чи можна за виглядом визначити «хороший» ембріон
- Навіщо культивувати до бластоцисти
- Що відбувається після культивування
Що відбувається після запліднення яйцеклітини
Після пункції ембріолог знаходить отримані ооцити та оцінює їх зрілість. Зрілі яйцеклітини можуть бути запліднені класичним методом ЕКЗ або методом ICSI — залежно від обраної тактики.
Сам спосіб запліднення — це лише початок лабораторного етапу. Навіть після проникнення сперматозоїда в яйцеклітину потрібно переконатися, що запліднення відбулося нормально, а потім спостерігати, чи продовжує ембріон розвиток.
Докладніше про різницю між способами запліднення читайте у матеріалі «ЕКЗ та ІКСІ: у чому різниця і коли рекомендують ІКСІ».
Про роботу з яйцеклітинами, сперматозоїдами та ембріонами в лабораторії загалом читайте на сторінці «Ембріологія».
1 день: що означає 2PN після запліднення
Приблизно через 16–17 годин після запліднення ембріолог оцінює його результат.
Однією з основних ознак нормального запліднення є наявність двох пронуклеусів — 2PN. Один містить генетичний матеріал яйцеклітини, другий — сперматозоїда.
Тому коли після пункції пацієнту повідомляють, наприклад, «нормально запліднилися 6 із 8 зрілих яйцеклітин», це означає, що на момент оцінки у шести зигот були виявлені ознаки нормального запліднення.
Сучасні рекомендації також описують нетипові варіанти пронуклеарної картини, тому лабораторна оцінка не зводиться лише до простої формули «не 2PN — значить ембріона немає». Такі ситуації ембріолог оцінює окремо.
2 день: початок поділу ембріона
Після злиття генетичного матеріалу починається дроблення — одна клітина послідовно ділиться на кілька бластомерів.
При стандартній оцінці на другий день розвитку орієнтиром для ембріона, який розвивається у типовому темпі, є приблизно 4 клітини.
Але розвиток не відбувається за секундоміром. Кількість клітин залежить від точного часу спостереження, способу запліднення та індивідуальної швидкості розвитку конкретного ембріона.
Ембріолог оцінює не лише число клітин, а й:
- їх розмір та симетричність;
- характер поділу;
- наявність фрагментації;
- особливості ядер;
- динаміку розвитку порівняно з попередньою оцінкою.
Тому фраза «ембріон має 4 клітини» сама по собі ще не є повним описом його якості.
3 день: стадія дроблення
До третього дня ембріон продовжує поділ. Типовим орієнтиром при стандартному часі оцінки є приблизно 8 клітин.
Водночас один ембріон може розвиватися трохи швидше, інший — повільніше. Саме тому ембріологи враховують не тільки число бластомерів, а всю морфологічну картину та динаміку.
У цей період частина ембріонів може почати відставати або припинити поділ. Інші продовжують розвиток і переходять до наступної стадії.
4 день: морула та компактизація клітин
Приблизно на четвертий день відбувається важлива перебудова: клітини ембріона щільніше контактують одна з одною, їхні межі стають менш помітними. Цей процес називається компактизацією.
Ембріон переходить до стадії морули.
На цьому етапі вже складно просто перерахувати окремі клітини, тому ембріолог оцінює ступінь компактизації та подальшу перебудову ембріона.
Наступним етапом стає формування порожнини всередині ембріона — початок переходу до бластоцисти.
5–6 день: формування бластоцисти
У багатьох ембріонів приблизно на п’ятий день формується бластоциста — складніша стадія розвитку, на якій уже можна розрізнити окремі структури.
Не всі ембріони стають бластоцистами саме на п’ятий день. Частині потрібно більше часу, і вони досягають потрібної стадії на шостий день. У деяких лабораторних ситуаціях розвиток можуть оцінювати і довше.
Тому повідомлення «на п’ятий день є дві бластоцисти, ще два ембріони залишили до завтра» не означає, що ці два ембріони вже втратили шанс на подальший розвиток.
Отримали 10 яйцеклітин, а до бластоцисти дійшли 3 — це нормально?
Це один із найважчих психологічно моментів програми ЕКЗ: після кожного повідомлення лабораторії цифра може ставати меншою.
Умовний шлях може виглядати так:
Це лише приклад для пояснення послідовності, а не норма, яку повинна отримати кожна пара.
Не існує універсальної формули, за якою з 10 яйцеклітин обов’язково має бути певна кількість бластоцист. Результат залежить від віку, зрілості та біологічних характеристик яйцеклітин, сперматозоїдів, особливостей конкретного циклу та розвитку кожного ембріона.
Тому правильніше оцінювати не те, наскільки сильно «впала цифра», а весь ембріологічний звіт послідовно:
отримані ооцити → зрілі ооцити → нормальне запліднення → розвиток на 2–3 день → морула → бластоциста.
Чому деякі ембріони зупиняються в розвитку
Ранній розвиток ембріона — складний біологічний процес. Для продовження поділу клітини повинні правильно проходити послідовні етапи активації генів, розподілу хромосом, енергетичного обміну та формування нових клітин.
Причини зупинки можуть бути пов’язані з:
- біологічними особливостями яйцеклітини;
- генетичними або хромосомними порушеннями;
- факторами, пов’язаними зі сперматозоїдом;
- аномальним характером перших клітинних поділів;
- комбінацією кількох факторів, яку не завжди можливо встановити для конкретного ембріона.
Чи можна «врятувати» ембріон, який перестав ділитися
Якщо ембріон справді припинив життєздатний розвиток через внутрішні біологічні причини, препарату або лабораторної процедури, яка могла б гарантовано відновити нормальний розвиток, не існує.
Завдання ембріологічної лабораторії — створити та підтримувати контрольовані умови культивування і правильно оцінювати розвиток, але лабораторія не може змінити всі біологічні характеристики конкретного ембріона.
Чи гірша бластоциста 6-го дня, ніж 5-го
Бластоциста, яка сформувалася на шостий день, не є автоматично «поганою» або непридатною. Такі ембріони можуть бути кріоконсервовані, перенесені та призводити до народження здорової дитини.
Водночас швидкість розвитку має прогностичне значення. У великих групах пацієнтів бластоцисти, які досягають відповідної стадії на п’ятий день, у середньому демонструють кращі репродуктивні результати, ніж ембріони, яким для цього потрібен шостий день.
Але для конкретної пари день формування бластоцисти — лише один із критеріїв. Ембріолог також враховує ступінь її розширення, внутрішню клітинну масу, трофектодерму та інші характеристики.
Тому фраза «ембріон 6-го дня» сама по собі не дозволяє зробити висновок, що він не має перспектив.
Що означають оцінки ембріона 4AA, 3BB або 5AB
На стадії бластоцисти ембріолог може використовувати систему морфологічної оцінки, у якій результат записують як цифру та дві літери, наприклад 4AA, 3BB або 5AB.
У поширеній системі Gardner кожна частина має окреме значення.
| Позначення | Що оцінюють | Що це означає |
|---|---|---|
| Цифра | Стадія розширення бластоцисти | Наскільки сформована та розширена порожнина бластоцисти і чи почався вихід з оболонки |
| Перша літера | Внутрішня клітинна маса — ICM | Оцінюється кількість та організація клітин внутрішньої клітинної маси |
| Друга літера | Трофектодерма — TE | Оцінюються клітини зовнішнього шару бластоцисти |
Наприклад:
- 4AA — розширена бластоциста з високою морфологічною оцінкою внутрішньої клітинної маси та трофектодерми;
- 3BB — сформована бластоциста з проміжними морфологічними характеристиками обох клітинних компонентів;
- 5AB — бластоциста, яка починає виходити зі своєї оболонки, з різними оцінками ICM і трофектодерми.
У різних лабораторіях можуть використовуватися певні модифікації систем оцінювання, тому результат ембріограми краще інтерпретувати разом з ембріологом.
Чи означає 4AA, що ембріон генетично здоровий і точно імплантується
Ні.
Морфологічна оцінка описує те, як ембріон виглядає та розвивається під час лабораторного спостереження. Вона допомагає ранжувати ембріони, коли потрібно визначити черговість переносу або кріоконсервації.
Але морфологія не показує безпосередньо набір хромосом.
Тому ембріон з оцінкою 4AA:
- може мати високі морфологічні характеристики;
- не отримує автоматичної гарантії нормального хромосомного набору;
- не має 100% гарантії імплантації;
- не гарантує настання або народження дитини лише на підставі своєї оцінки.
Так само ембріон із нижчою морфологічною оцінкою не означає автоматично «поганий результат» — такі бластоцисти також можуть призводити до вагітності.
Навіщо ембріони культивують до стадії бластоцисти
Подовжене культивування дозволяє побачити, які ембріони здатні продовжити розвиток до стадії бластоцисти, і отримати більше інформації для їхнього ранжування перед переносом або кріоконсервацією.
Але це не означає, що перенос на п’ятий день є універсально найкращим рішенням у кожній програмі.
При невеликій кількості ембріонів або в інших клінічних ситуаціях тактика може відрізнятися. При подовженому культивуванні також існує ймовірність, що жоден ембріон не досягне стадії, придатної для переносу або кріоконсервації.
Тому рішення щодо тривалості культивування залежить від кількості та розвитку ембріонів, попередньої історії лікування, плану програми та лабораторної тактики.
Що відбувається з бластоцистами далі
Після оцінки бластоцист подальша тактика залежить від конкретної програми.
Ембріон може бути:
Саме рішення щодо переносу, кріоконсервації або інших лабораторних етапів залежить від плану конкретної програми.
Загальну послідовність лікування читайте на сторінці «ЕКЗ у Києві», а доступні варіанти програм — у розділі «Програми ЕКЗ».
На консультації репродуктолог пояснить послідовність етапів лікування та можливі варіанти програми, а ембріологічна команда супроводжуватиме лабораторний етап — від запліднення яйцеклітин до оцінки та культивування ембріонів.
Записатися на консультацію репродуктолога →
